酶促反应的速率会受多种因素影响,如温度、pH值、底物与酶的浓度、激动剂与抑制剂等。其中抑制剂可分为可逆性抑制剂与不可逆性抑制剂,可逆性抑制剂与酶非共价可逆性结合,使酶的活性降低或消失,故可采用物理方法将其除去,从而恢复酶的活性。但不可逆性抑制剂主要与酶活性中心上的必需基团结合,使酶的活性丧失,故不能运用物理方法将其除去。如有机磷抑制胆碱酯酶即属于不可逆性抑制作用。
可逆性抑制剂包括:竞争性抑制剂、非竞争性抑制剂、反竞争性抑制剂。
(1)竞争性抑制剂,其结构与底物结构相似,故竞争性抑制剂可与底物竞争同一个酶,竞争抑制作用的强弱取决于二者的浓度,浓度高者,作用更强,此时酶促反应的Vmax(最大反应速度)不变,而底物与酶亲和力因抑制剂的出现减小,故表观Km值增大。竞争性抑制作用常见于各种药物,如:磺胺药抑制二氢叶酸合成酶。
(2)非竞争性抑制剂与酶活性中心以外位点结合,不存在竞争性作用,故不影响酶与底物的结合,但底物-酶-抑制剂复合物不能释放出产物,故Vmax(最大反应速度)减小,酶与底物的结合不受影响即二者之间亲和力不变,故表观Km值不变,如:亮氨酸抑制精氨酸酶则属于非竞争性抑制作用。
(3)反竞争性抑制剂既不和酶结合也不与底物结合,而只能与酶底物复合物结合,导致中间产物量减少,故Vmax(最大反应速度)下降,由于中间产物量下降使得酶与底物亲和力进一步增强,故表观Km值增大。
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