克氏双糖铁琼脂(KIA)通过不同细菌发酵葡萄糖和乳糖,及产生硫化氢的生化反应结果不同,用于革兰阴性杆菌,主要是肠杆菌科细菌的鉴别。
KIA成分中含有葡萄糖和乳糖,二者比例为1:10.指示剂为酚红。酚红在PH<6.8时变为黄色,PH>8.4时变为红色。KIA产少量的酸就可导致颜色变化,但由于KIA的斜面部分暴露于空气中,为有氧环境,当产酸量少时,斜面部分易挥发、氧化,导致斜面部分的培养基呈现红色。而下部与空气隔绝是相对厌氧的环境,细菌发酵糖类所生成的酸类物质不会被氧化挥发,因此当有酸产生时,底层培养基会呈黄色并保持。
因此克氏双糖铁琼脂不同的结果代表了不同的含义,常见的有以下几种变化:
1.斜面红,底层黄——细菌发酵葡萄糖,不发酵乳糖
底层呈现黄色说明细菌有分解糖类产酸。但是由于斜面呈现的是红色,说明产酸量少,斜面上被氧化产生氨呈弱碱性。KIA中葡萄糖的含量较少,仅产生少量的酸,因此该菌细菌发酵葡萄糖,而不发酵乳糖。
2.斜面黄,底层黄——细菌发酵葡萄糖,发酵乳糖
因为把葡萄糖和乳糖都消耗了,所以产生的酸非常多,无论斜面和底层都是黄色。所以,该细菌发酵葡萄糖,发酵乳糖。
3.底层和斜面均不变色——细菌既不分解葡萄糖,也不分解乳糖
4.产气
若该细菌发酵糖类产气,那么会在培养基中产生气泡。更甚者产生的气体会使培养基断裂。
5.产H2S
培养基中含有硫酸亚铁,如果细菌产H2S,则会与Fe2+作用生成黑色的FeS,在下层会变成黑色。
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