对流免疫电泳是免疫电泳技术的一种,在类别上属于沉淀反应。对流免疫电泳是将双向免疫扩散技术与电泳相结合,在直流电场中定向加速度的免疫扩散技术。
其基本原理是:在琼脂板上打两排孔,左侧各孔加入待测抗原,右侧孔内放入相应抗体,抗原在阴极侧,抗体在阳极侧。通电后,带负电荷的抗原受到正电荷吸引泳向正极,泳向阳极抗体侧,而抗体虽然也带有负电荷,但是抗体主要受到电渗作用流向阴极抗原侧,即抗体受到的电渗作用大于正负电荷相互吸引的作用。在两者之间或抗体的另一侧(抗原过量时)形成沉淀线。
对流免疫电泳相对于双向免疫扩散的优点主要有两个:
1.加快了沉淀反应的速度:沉淀反应的发生分为两个阶段,第一个阶段发生特异性结合,需要几秒到几十秒即可完成,第二阶段形成可见的免疫复合物,大约需要几十分钟到数小时才能完成。而对流免疫电泳加快了抗原和抗体的运行速度,极大的缩短了第二阶段可见反应的时间,加快了反应速度,提高了实验效率。
2.提高了灵敏度:双向免疫扩散实验时抗原抗体的扩散是向四周发散的,虽然可以形成沉淀线,但是灵敏度并不高。加上电泳以后,对流免疫电泳使得抗原抗体的扩散方向固定集中,减少了向四周扩散对抗原抗体的浪费,极大的提高了抗原抗体结合的灵敏度,可以适用于一些微量抗原或抗体性质的鉴定。
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