显色反应
利用化学反应检识皂苷,虽然灵敏度较高,但专属性较差。通常应用的显色反应有以下几种。
1.Liebermann反应样品溶于乙酐中,加入一滴浓硫酸,呈黄→红→蓝→紫。绿等颜色变化,最后褪色。
2.醋酐一浓硫酸(Liebermann—Burchard)反应 将样品溶于醋酐中,加入浓硫酸一醋酐(1:20)数滴,呈色同上。此反应可以区分三萜皂苷和甾体皂苷,前者最后呈红或紫色,后者最终呈蓝绿色。
3.三氯乙酸反应将含甾体皂苷样品的三氯甲烷溶液滴在滤纸上,加三氯乙酸试液一滴,加热至60℃,生成红色渐变为紫色。在同样条件下三萜皂苷必须加热至l00℃才能显色,也生成红色渐变为紫色,可用于纸层析。
4.三氯甲烷一浓硫酸反应样品溶于三氯甲烷后加入浓硫酸,在三氯甲烷层呈现红色或蓝色,硫酸层有绿色的荧光。
5.五氯化锑反应将皂苷样品溶于三氯甲烷或醇后,点于滤纸上,喷以20%五氯化锑的三氯甲烷溶液(不应含乙醇和水),干燥后60~70℃加热,显蓝色、灰蓝色或灰紫色斑点。
6.芳香醛一硫酸或高氯酸反应在使用芳香醛为显色剂的反应中,以香草醛最为普遍,其显色灵敏,常作为甾体皂苷的显色剂。除香草醛外,尚可应用的还有对一二甲氨基苯甲醛。
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